退火温度(Annealing Temperature) 为引物和模板结合时候的温度参数，当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度·它是影响PCR特异性的较重要因素。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火， 同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般设定比引物的 Tm低5℃。

• 中文名 退火温度
• 外文名 Annealing Temperature
• 解释 引物和模板结合时候的温度参数
• 特点 一般设定比引物的 Tm低5℃

结合可能

　　在模板变性后温度快速冷却至40℃~60℃(某个退火温度)的时候，可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多，引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞，这就使PCR后期的过程成为可能。

温度时间

　　退火温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，还有靶基序列的长度。对于20个核苷酸，G+C含量约50%的引物，55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度:

　　Tm值(解链温度)=4(G+C)+2(A+T)

　　复性温度=Tm值-(5~10℃)

　　在Tm值允许范围内， 选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合， 提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30~60sec，足以使引物与模板之间完全结合。

　　在金属加工领域，退火温度是指退火时金属应加热达到的温度。据有关文献介绍，不同金属材料的退火温度为:铂，900-1000℃;铜，650℃;黄铜，600-650℃;镍银，650-680℃;铝，283-350℃等。