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质粒扩增

2022-06-29 04:33:18 百科资料

质粒扩增是大量获取质粒的一种化学生物学方法,通常包括将细菌质粒转化到大肠杆菌中,然后从大肠杆菌中收获大量质粒的过程。

  • 中文名 质粒扩增
  • 目    的 收获大量质粒
  • 类    型 化学生物学方法
  • 步    骤 细菌铺板挑选菌落摇菌裂解抽提

质粒扩增

  质粒扩增是大量获取质粒的一种化学生物学方法​,通常包括将细菌质粒转化到大肠杆菌中,然后从大肠杆菌中收获大量质粒的过程。

质粒扩增

步骤

  细菌铺板:让细菌在LB培养基上生长,培养基上为了防止杂菌生长,会加入抗生素,而含有目标质粒的细菌带有抗生素的抗性,能够正常生长,从而保证板子上长出来的会是目标菌落。

  挑选菌落:从LB培养基上挑选菌落备用

  细菌培养:将挑好的菌落放到大肠杆菌培养液当中,并于37摄氏度培养箱中以250rpm摇动8~12h,使大肠杆菌繁殖

  裂解抽提:采用细胞裂解的方式,从含目标质粒的大肠杆菌菌液中将质粒提取出来

用途介绍

  这一实验主要用于获取较多的质粒,质粒扩增需要的源头质粒量非常小,1微克的质粒都已经能够满足扩增的需要,这也使得质粒的使用和赠送变得非常容易。质粒的用途往往是用于转染细胞,通过转染的方式让细胞表达质粒中携带的基因,从而研究该基因对应蛋白的性能。在基础细胞生物学研究中起着非常重要的作用。

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