在某一PH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时的溶液pH称该氨基酸的等电点。

• 中文名称 氨基酸等电点
• 外文名称 Isoeletric point of amino acids
• ph 称该氨基酸的等电点。
• 定义 氨基酸净电荷为零时的pH值
• 计算公式 pI=1/2(pKa1+PKa2)

氨基酸等电点

　　isoeletric point ，pI 定义:

　　2、氨基酸净电荷为零时的pH值。

　　3、氨基酸是两性电解质，在碱性溶液中表现出带负电荷，在酸性溶液中表现出带正电荷，在某一定pH溶液中，氨基酸所带的正电荷和负电荷相等时的pH,称为该氨基酸的等电点。

pI的计算公式:

　　1、对于侧链R基不解离得中性氨基酸来说，pI=1/2(pKa1+PKa2)。

　　2、对于有多个解离基团的氨基酸来说，只要写出它的解离公式，然后取等电兼性离子两边的pKa的平均值则得出其pI值。

　　注:pI值与该离子浓度基本无关，只取决于等电中性离子A两侧的pK值。

氨基酸的浓度测定

　　1、氨基酸的甲醛滴定(formal titration)

原理

　　氨基酸虽然是一种两性电解质，即是酸性又是碱性，但它却不能直接用酸碱滴定来进行测量。这是因为氨基酸的酸碱滴定的等电点pH过高(12-13)或是过低(1-2)没有适合的指示剂可备选用。而向氨基酸中加入过量的甲醛，用氢氧化钠滴定时，由于甲醛可与氨基酸上的-NH3结合，形成-NH-CH2OH、-N(CH2-OH)2等羟甲基衍生物，而降低了氨基酸的碱性，相对增强了-NH3的解离，使滴定终点移到了pH9附近，在酚酞指示剂的变色区域内，能够用酚酞作为指示剂进行滴定。

　　以上出自《生物化学》(高等教育出版社 2006.5，王镜岩等主编)

流程

　　甲醛滴定法测定氨基酸含量

　　目的

　　初步掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点

　　原理

　　水溶液中的氨基酸为兼性离子，因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基。甲醛可与氨基酸上的-NH3结合，形成-NH-CH2OH、-N(CH2-OH)2 等羟甲基衍生物，使NH3上的H游离出来，这样就可以用碱滴定NH3放出H，测出氨基氮，从而计算氨基酸的含量。

　　若样品中只含有单一的已知氨基酸，则可由此法滴定的结果算出氨基酸的含量。若样品中含有多种氨基酸(如蛋白质水解液)，测不能由此法算出氨基酸的含量。

　　脯氨酸与甲醛作用后，生成的化合物不稳定，导致滴定后结果偏低;酪氨酸含酚基结构，导致滴定结果偏高。

　　材料、试剂与器具

　　(一)试剂

　　1、0.5%酚酞酒精溶液

　　称0.5g酚酞溶于100ml60%酒精中。

　　2、0.05%溴麝香草酚蓝溶液

　　取0.05溴麝行草酚蓝溶于100ml 20%乙醇溶液中。

　　3、1%甘氨酸溶液

　　取1g甘氨酸溶于100ml蒸馏水。

　　4、标准0.100mol/L 氢氧化钠溶液

　　5、中性甲本醛溶液

　　取甲醛溶液50ml，加0.5%酚酞指示剂约3ml，滴加0.1mol/LnaOH溶液，使溶液呈微粉红色，临用前中和。

　　(二)实验器具

　　1、锥形瓶 2、碱式滴定管

　　3、 移液管洗耳球 4、天平

　　5、容量瓶 6、试剂瓶

　　7、量筒 8、玻棒与烧杯

操作步骤

　　1、取3只100ml锥形瓶，按下表加入试剂

　　2、混匀后用标准0.100mol/L氢氧化钠溶液滴定至紫色(pH8.7~9.0)

　　3、结果计算

　　每毫升氨基酸溶液中含氨基氮的毫克数为

　　式中:V1为滴定样品消耗氢氧化钠的体积(ml);

　　V2为滴空白消耗氢氧化钠的体积(ml);

　　1.4008 为1ml 0.1mol/L氢氧化溶液相当的氮量(mg)

注意事项

　　利用甲醛滴淀法可以用来测定蛋白质的水解程度。随着蛋白质水解度的增加，滴定值也增加，当蛋白质水解完成后，滴定值不再增加。

氨基酸等电点表

　　甘氨酸5.97

　　丙氨酸6.00

　　缬氨酸5.96

　　亮氨酸5.98

　　异亮氨酸6.02

　　苯丙氨酸5.48

　　丝氨酸5.68

　　苏氨酸6.16

　　酪氨酸5.66

　　半胱氨酸5.05

　　蛋氨酸5.74

　　脯氨酸6.30

　　色氨酸5.89

　　赖氨酸9.74

　　精氨酸10.76

　　组氨酸7.59

　　天冬氨酸2.77

　　谷氨酸3.22

　　天冬酰胺5.41

　　谷氨酰胺5.65

　　出自《有机化学》(高等教育出版社 2004.11，曾昭琼主编)