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庖肉培养基

2022-07-12 00:16:24 百科资料

庖肉培养基是由牛肉浸液、蛋白胨、酵母膏、磷酸二氢钠、葡萄糖、可溶性淀粉、碎肉渣等制成的装置。

成分

  牛肉浸液 1000mL

  蛋白胨 30g

  酵母膏 5g

  磷酸二氢钠 5g

  葡萄糖 3g

  可溶性淀粉 2g

  碎肉渣 适量

  pH 7.8

制法

  1 称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉500g,加蒸馏水1000mL和1mol/L氢氧化钠溶液25mL,搅拌煮沸15min,充分冷却,除去表层脂肪,澄清,过滤,加水补足至1000mL。加入除碎肉渣外的各种成分,校正pH。

  2 碎肉渣经水洗后晾至半干,分装15mm×150mm试管约2~3cm高,每管加入还原铁粉0.1~0.2g或铁屑少许。将上述液体培养基分装至每管内超过肉渣表面约1cm。上面覆盖溶化的凡士林或液体石蜡0.3~0.4cm。121℃高压灭菌15min。

详细配制

  庖肉培养基(用于培养和保藏厌氧菌)

  (1)去膘牛肉:取已去筋膜、脂肪的牛肉500g,切成黄豆大小的颗粒,放入盛有1000ml蒸馏水的烧杯中,用文火煮沸约1h。

  (2)过滤:用纱布过滤后取若干牛肉渣粒装入亨盖特滚管或普通试管,装量达15mm左右的高度。在于试管中加入PH7.4~7.6的牛肉膏蛋白胨液体培养基10~12ml,最后塞上黑色异丁基橡胶塞。

  (3)灭菌:在异丁基橡胶塞上插1枚注射器针头,放入灭菌锅内,于121℃下灭菌20min。灭菌后立即拔去针头,并塞紧管塞。若以无氧法分装成的无氧培养基的亨盖特滚管,则可免插注射器针头,但要将各滚管塞压紧后再进行灭菌,这样制备成的滚管称为PRAS培养基(或称为预还原性厌氧无菌培养基),使用前也不必驱氧,但需无氧无菌操作法转移或接种。

  (4)使用前除氧:若厌氧培养基在存放中有氧气渗入,使用前置水浴中煮沸10min,以除去溶入的氧,在高纯氮气饱和下冷却后避氧无菌操作接种。

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