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大肠杆菌质粒DNA

2022-07-14 03:34:45 百科资料

简介

  ​大肠杆菌质粒DNA

  大肠杆菌是原核细胞,胞内DNA以数个环形质粒的状态存在,与组蛋白2a、2b、3、5形成的八聚体结合。

  质粒DNA的提取有多种方法,目前常用的有碱变性法、煮沸裂解法、羟基磷灰石柱层析法、酸酚法、两相法、氯化铯-溴化乙锭密度梯度离心法等。本实验采用碱裂解法,其原理是在pH高于12.6的情况下,染色体DNA的氢键断裂,导致双螺旋结构解开而变性,而闭环的质粒DNA由于处于拓扑缠绕状态而不能彼此分开。当pH调至中性时,变性的染色体DNA不能复性,而质粒DNA能迅速恢复到原来的构型。

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