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基因工程靶向细胞疗法

2022-06-25 12:09:30 百科资料

基因工程靶向细胞是利用基因工程研究成果开展的一种生物免疫治疗方法。是国际上治疗尖锐湿疣、生殖器疱疹疾病切实可行的生物免疫治疗方法,它能够特异性识别并杀灭HPV/HSV病毒,具有快速治愈,标本兼治等优点。

  • 中文名 基因工程靶向细胞疗法
  • 类型 生物免疫治疗方法
  • 优点 快速治愈,无复发,标本兼治
  • 又称 生物免疫疗法中的细胞治疗技术
  • 治疗 尖锐湿疣、生殖器疱疹

基本简介

  基因工程靶向细胞疗法也称为生物免疫疗法中的细胞治疗技术,是国际公认的最具应用前景的治疗技术之一。主要利用DNA重组技术,将目的基因与载体DNA在体外进行重组,然后把这种重组DNA分子引入受体细胞,并使之增殖和表达的技术。

步骤

  将一种生物的DNA中的某个遗传密码片段连接到另外一种生物的DNA链上去,将DNA重新组织一下,就可以按照人类的愿望,设计出新的遗传物质并创造出新的生物类型,这基因工程一般包括四个步骤:

取得符合人们要求的DNA片段

  要把目的基因从供体 DNA长链准确地剪切下来,可不是一件容易的事。1968年,沃纳·阿尔伯、丹尼尔·内森斯和汉弥尔顿·史密斯第一次从大肠杆菌中提取出了限制性内切酶,它能够在DNA上寻找特定的"切点",认准后将DNA分子的双链交错地切断。人们把这种限制性内切酶称为"分子剪刀"。这种"分子剪刀"可以完整地切下个别基因。自1970年代以来,人们已经分离提取了 400多种"分子剪刀"。有了形形色色的"分子剪刀",人们就可以随心所欲地进行DNA分子长链的切割了。

构建基因表达载体

  DNA的分子链被切开后,还得缝接起来以完成基因的拼接。1967年,科学家们在5个实验室里几乎同时发现并提取出一种酶,这种酶可以将两个DNA片段连接起来,修复好DNA链的断裂口。1974年以后,科学界正式肯定了这一发现,并把这种酶叫作DNA连接酶。从此,DNA连接酶就成了名符其实的"缝合"基因的"分子针线"。只要在用同一种"分子剪刀"剪切的两种 DNA碎片中加上"分子针线",就会把两种DNA片段重新连接起来。

将目的基因导入受体细胞

  把"拼接"好的 DNA分子运送到受体细胞中去,必须寻找一种分子小、能自由进出细胞,而且在装载了外来的 DNA片段后仍能照样复制的运载体。理想的运载体是质粒,因为质粒能自由进出细菌细胞,应当用"分子剪刀"把它切开,再给它安装上一段外来的 DNA片段后,它依然如故地能自我复制。此方法适用于植物细胞的基因工程。此外,将目的基因导入动物细胞可选用显微注射法,导入微生物细胞可以使用钙离子(如氯化钙)处理细胞使其可以吸收外界的DNA分子。

目的基因的检测与鉴定

  目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过检测与鉴定才能知道。这是检测基因工程是否成功的一步。

  首先,要检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因。方法是采用DNA分子杂交技术,即将转基因生物的基因组DNA提取出来,在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等做标记,以此作为探针,使探针与基因组DNA杂交,如果显示出杂交带,就表明目的基因已插入染色体DNA中。该方法因发现者而命名为"Southern"印记。

  其次,还需要检测目的基因是否转录出了mRNA,检测方法同样是分子杂交技术,与上述方法不同的是需从转基因生物中提取mRNA,做上标记以进行检测。由于Southern印记名称的缘故,所以该方法被称为"Northern"印记。

  最后,检测目的基因是否翻译成蛋白质。方法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原-抗体杂交,若有杂交带出现,表明目的基因已经形成蛋白质产品。该方法又成为"Western"印记。

治疗原理

  基因工程靶向细胞疗法治疗尖锐湿疣、生殖器疱疹技术可以打破患者病部免疫抵制状态。根据患者不同感染状态和尖锐湿疣、疱疹病毒型别,先从患者体内提取部分单个核细胞,以特有技术赋予识别抗原的特异性,诱导患者自体免疫细胞增殖,然后再回输到患者体内,高效靶向性杀灭血液中和细胞内的人类乳头瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒(HSV)病毒。

  此种技术能够高效减缓和阻止HPV、HSV病毒扩散进程,从内在消除尖锐湿疣、生殖器疱疹患者生命之威胁。还可杀灭尖锐湿疣、生殖器疱疹病毒,使相当部分尖锐湿疣、生殖器疱疹患者在短时间内达到治疗目标。也就是说,基因工程靶向细胞疗法是通过患者本身健康的免疫细胞,通过体外诱导,再回输会患者身体,实现自愈。因此基因工程靶向细胞治疗是切实可行的技术手段,是目前最新、最好的生物治疗方法。

原理图

治疗效果

  一、能高效减缓和阻止HPV、HSV病毒扩散进程,从内解除尖锐湿疣、疱疹患者生命之威胁。

  二、可杀灭尖锐湿疣、疱疹病毒,使相当部分尖锐湿疣、疱疹患者在短时间内达到治疗目标。

技术特性

  特异性:专攻感染的细胞,对正常细胞及其它机体组织无任何影响。

  主动性:增殖并活化的免疫细胞回输后,可主动在体内诱发免疫应答反应。

  高效能:特异性细胞免疫清除病毒。

  记忆性:体内的TM(记忆细胞)具有记忆功能,再次发现HPV、HSV同样杀灭,可防止再感染。

  长久性:这种对HPV、HSV的特异免疫杀伤细胞可长期在体内存在,可防止复发。

  安全性:回输的免疫细胞来自患者自身,无排斥反应,安全性高,毒副作用少。

  因此基因工程靶向细胞疗法是治疗尖锐湿疣、疱疹病毒及其感染的细胞切实可行的技术手段,是目前最新、最好的生物治疗方法。

跟踪检查

  治疗期间每月复查及HPV、HSV-DNA定量一次,治疗结束后全面复查一次。疗程结束后随访1-3年,随访期间每半年做相关检查一次。

治疗流程

  1、抽取尖锐湿疣、疱疹患者适量外周血;

  2、分离得到单个核细胞;

  3、分别加入不同的诱导因子;

  4、促使单核细胞转变为DC;

  5、加入特异性抗原或特殊抗体;

  6、DC将HPV、HSV特异性抗原摄取并加工,同时自身由不成熟走向成熟;

  7、将培养好的细胞回输给患者;

  8、免疫细胞接受HPV、HSV抗原信息,分化为特异性杀伤细胞;

  9、杀伤细胞以非溶胞机制抑制和杀灭胞内病毒;

  10、具有能识别和杀伤HPV、HSV功能的免疫细胞对尖锐湿疣、生殖器疱疹病毒进行彻底有效的杀灭;

  11、彻底恢复机体免疫系统,各项指标达到治愈标准。

应用现状

  基因工程靶向细胞疗法是生物治疗中的重要组成部分,是主要的免疫学治疗方法。运用靶向细胞治疗尖锐湿疣、生殖器疱疹,能有效的清除尖锐湿疣在皮肤黏膜组织中的HPV病毒和生殖器疱疹在血液和细胞中得HSV病毒。这种治疗方法具有高度的特异性,即针对患者自身所感染病毒的类型及个体HPV、HSV基因分析,实现了个体化治疗、靶向清除而不损伤正常细胞。

应用前景

  回顾基因工程的快速发展,基因工程所取得的多项成就令人兴奋不已。随着科学技术的全面飞速发展,该项技术必将有极大突破,开展到更多医学领域。对人类的健康产生及其深远的影响。

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