切口平移(nick translation)是切口产生3'羟基和5'磷酸基团，DNA延伸合成3'端，5'端被小片段降解，缺口位点沿着双链向3'端移动，是在体外向DNA分子引入放射性标记核苷酸的技术。

• 中文名称 切口平移
• 外文名称 nick translation

简介

　　切口平移（nick translation）：切口产生3‘羟基和5’磷酸基团，DNA延伸合成3‘端，5’端被小片段降解，缺口位点沿着双链向3‘端移动，是在体外向DNA分子引入放射性标记核苷酸的技术。

　　切口平移法的缺点：

　　1.放射物质摄入率较低；

　　2.长时间反应后在DNA Pol I的外切酶活性的作用下，将已经掺入的放射性物质游离下来，降低了摄入率；

　　3.必须有高纯度的模板DNA；

　　4.反应后必须除去未反应的放射性dNTP。

基本操作

　　步骤

　　1、用DNase I处理双链DNA，使之随机产生单链断裂。

　　2、DNA聚合酶I的5‘-3’外切酶活性从断裂处5‘除去一个核苷酸，同时5‘-3'聚合酶活性将一个放射性核素标记的单核苷酸       引入到断裂的3'端。

　　3、反应重复进行，结果标记的核苷酸代替了原来的核苷酸残基，形成了放射性的DNA分子。