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pcr引物设计

2022-06-29 16:28:52 百科资料

PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。

  PCR引物的设计原则

  1. 引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。

  2.产物不能形成二级结构。

  3. 引物长度一般在15~30碱基之间。

  4. G+C含量在40%~60%之间。

  5. 碱基要随机分布。

  6. 引物自身不能有连续4个碱基的互补。

  7. 引物之间不能有连续4个碱基的互补。

  8. 引物5′端可以修饰。

  9. 引物3′端不可修饰。

  10. 引物3′端要避开密码子的第3位。

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