全书共分3篇。第1篇为细胞工程基础，主要概括介绍了细胞工程的发展和套用、基本设备及其使用和无菌技术等；第2篇为植物细胞工程，主要包括植物的快速繁殖与脱病毒、胚胎和胚乳培养、胚珠和子房培养与离体受精、花粉和花葯培养、植物细胞培养以及次生物质生产、原生质体培养与体细胞杂交和植物种质的超低温保存技术等；第3篇为动物细胞工程，主要包括动物细胞培养的基本技术、细胞融合与杂交瘤技术、细胞重组与动物克隆以及干细胞技术等。

本书可用作综合院校、师範院校以及农林院校细胞工程课程的教材，也可供其他院校有关专业的相关课程选用或参考。

第1篇细胞工程基础

第1章绪论1

11细胞工程的定义和基本内容1

12细胞工程中的基本技术2

121细胞培养技术2

122细胞融合技术3

123其他技术3

13细胞工程发展简史3

131植物细胞工程的发展3

132动物细胞工程的发展4

14细胞工程的主要套用5

141植物细胞工程的套用5

142动物细胞工程的套用6

思考题7

第2章细胞工程中的常用设备8

21细胞工程实验室常用部分仪器设备8

211水纯化装置8

212超音波清洗器8

213蒸汽压力灭菌器9

214乾热灭菌设备10

215过滤除菌装置10

216超净工作檯12

217培养箱12

218摇床13

219移液器13

2110显微镜14

2111显微操作仪14

2112冷冻存储设备15

2113血球计数板15

22常用器皿16

221培养器皿16

222金属器械17

23常用培养用品的清洗17

231玻璃器皿的清洗17

232橡胶製品的清洗17

233除菌滤器的清洗18

234塑胶器皿的清洗18

235金属器械的清洗18

236其他18

237常用洗涤液的种类和配製18

思考题19

第3章无菌技术20

31常用灭菌方法及原理20

311热力灭菌20

312电离辐射灭菌22

313紫外线杀菌23

314过滤除菌23

315化学杀菌23

32无菌操作注意事项24

321无菌操作室的消毒24

322常见污染原因和预防措施25

33实验室生物安全26

思考题27第2篇植物细胞工程

第4章植物细胞工程的基本原理和

技术基础28

41植物细胞工程的基本原理28

411植物细胞的全能性28

412植物激素的调控作用28

42植物细胞和组织培养所需的营养和

环境条件29

421培养基的组成和配製29

422影响植物组织培养的环境条件32

43外植体的选择及消毒33

431外植体的选择33

432植物材料的消毒34

44外植体的切取和培养36

441外植体的切取36

442外植体的接种和培养36

思考题37

51植物的快速繁殖技术38

511快速繁殖的一般技术38

512无糖组织培养技术42

513快速繁殖中应注意的问题45

514快繁实例：月季快繁47

52植物工厂化育苗47

521工厂化育苗的概念和基本特点47

522工厂化育苗的一般程式48

523工厂化育苗的主要设施48

524操作实例:葡萄试管苗的快速繁殖及工厂化育苗49

思考题56

第6章植物的胚胎培养57

61植物的胚胎培养57

611成熟胚的培养57

612幼胚的培养58

613植物胚胎培养的套用61

62胚珠和子房培养62

621胚珠培养62

622子房培养63

623未传粉子房和胚珠培养产生单

倍体64

63离体授粉65

631离体授粉技术的基本过程65

632影响离体授粉成功的因素66

633离体授粉技术在杂交育种上的

套用67

634操作实例：小麦雌蕊的离体

授粉67

64离体受精68

641雌雄配子分离68

642诱导融合69

643合子培养70

65胚乳培养71

651胚乳培养的基本过程72

652影响胚乳培养的主要因素73

653操作实例：大麦的胚乳培养75

思考题76

第7章花葯和花粉培养77

71花葯培养77

711材料的选择77

712预处理78

713培养基78

714培养方式80

715培养条件80

716花粉植株的倍性及染色体加倍81

72花粉培养82

721材料的选择和预处理82

722花粉的分离83

723花粉培养方法83

73花葯和花粉培养中的白化苗问题84

731白化苗产生的原因84

732植物白化苗研究存在的问题与

展望87

74操作实例88

741菸草花葯培养88

742菸草花粉培养88

思考题88

第8章植物的细胞培养及次生物质

生产89

81植物的单细胞培养89

811单细胞的分离89

812单细胞培养技术90

82植物细胞的悬浮培养93

821细胞悬浮培养的一般过程93

822悬浮培养工艺94

83植物细胞的大规模培养和次生物质

生产95

831细胞株的筛选97

832培养基的选择97

833培养条件的选择99

834生物反应器的选择99

835产物的分离纯化104

836操作实例：伊贝母细胞培养及

生物硷含量测定105

思考题106

第9章原生质体培养和体细胞杂交107

91原生质体的分离与纯化107

911原生质体的分离107

912原生质体的纯化与活力测定109

92原生质体培养111

921培养基111

922培养方法111

923原生质体的再生培养113

924操作实例：三叶半夏的原生质体

培养114

93体细胞杂交115

931原生质体的选择115

932原生质体诱导融合的方法116

933杂种细胞的选择118

934体细胞杂种的鉴定119

935体细胞杂种的遗传特徵120

思考题120

第10章植物种质的超低温保存121

101抑制外植体生长的离体保存方法121

1011降低温度122

1012降低环境中的氧含量122

1013使用生长抑制物质122

1014其他方法122

102离体植物材料的超低温冰冻保存技术123

1021超低温保存原理及基本程式123

1022材料的选择123

1023材料的预处理123

1024冰冻保护剂预处理124

1025降温冰冻操作124

1026化冻操作127

1027化冻材料的活力检测128

1028超低温种质保存实例128

思考题129第3篇动物细胞工程

第11章动物细胞培养所需的基本

条件130

111动物细胞培养基的组成和製备130

1111水和平衡盐溶液130

1112天然培养基131

1113合成培养基133

1114无血清培养基135

112影响动物细胞培养的环境因素138

1121温度138

1122pH138

1123氧气和二氧化碳139

1124渗透压139

思考题139

第12章动物细胞培养技术140

121原代培养140

1211取材140

1212分离细胞141

1213原代培养常用方法145

122传代培养146

1221贴壁生长细胞传代146

1222半悬浮生长细胞传代146

1223悬浮生长细胞传代146

123细胞系与细胞克隆147

1231细胞系(株)的建立147

1232细胞克隆技术147

1233克隆的分离149

124动物细胞的大规模离体培养技术150

1241气升式培养系统151

1242微载体培养系统151

1243中空纤维培养系统152

1244微囊培养系统154

1245旋转式细胞培养系统154

1246大规模动物细胞培养技术的套用和存在的问题155

125动物细胞的超低温保存技术155

1251冷冻保护剂156

1252常规冷冻方法156

1253玻璃化冻存方法156

思考题157

第13章动物细胞融合和杂交瘤技术158

131动物细胞融合技术158

1311诱导细胞融合的方法158

1312融合细胞的筛选161

1313杂交细胞的遗传表型162

132杂交瘤技术与单克隆抗体生产162

1321亲本选择163

1322细胞融合164

1323杂交细胞的筛选164

1324杂交瘤细胞的克隆培养165

1325单克隆抗体的生产165

思考题166

第14章细胞重组及动物克隆技术167

141细胞重组技术168

1411细胞重组的方式168

1412细胞重组原料的製备168

142细胞核移植和动物克隆技术170

1421核移植技术的一般操作程式170

1422胚胎细胞核移植172

思考题178

第15章干细胞技术179

151干细胞概述179

1511干细胞研究的发展179

1512干细胞的定义和分类180

1513干细胞的生物学特点181

152细胞分离纯化常用技术184

1521利用细胞体积和密度进行分离纯化184

1522选择性细胞凝集185

1523基于不同黏附特性的细胞分离方法185

1524利用细胞表面标誌分离纯化细胞的方法185

153胚胎干细胞187

1531胚胎干细胞的分离187

1532胚胎干细胞的培养187

1533胚胎干细胞的鉴定189

1534胚胎干细胞的诱导分化189

1535胚胎干细胞的套用前景及存在问题190

154成体干细胞192

1541间充质干细胞193

1542造血干细胞194

1543成体干细胞的套用前景和存在问题197

1551iPS细胞的建立200

1552iPS技术的改进201

1553iPS细胞的套用前景和尚待

解决的问题204

思考题206

附录207

附录1植物组织细胞培养基207

附录2一些植物生长物质及其主要

性质213

附录3动物细胞培养基214

附录4无血清培养液的添加成分219

附录5一些常用有机物的性质220

附录51一些碳水化合物及其主要

性质220

附录52一些维生素及其主要性质221

附录53一些胺基酸及其主要性质221

参考文献223