肽核酸

作者：何为、马立人 主编

丛书名：

出版日期：2003年8月

书号：7-5025-4471-2

开本：32 装帧：平膜

版次：1版1次

页数：288页

肽核酸(PNA)是一种以中性醯胺键为骨架併兼有多肽和核酸性质的独特化合物，可以高度亲和并序列特异地与DNA和RNA结合，而且形成的杂交複合物具有相当高的热稳定性以及独特的耐离子强度变化性质。PNA不能被蛋白酶和核酸酶所降解。本书是在收集了截止于2002年12月所发表的有关PNA的文献以及internet上的一些相关资料，编写而成的。详细地阐述了有关PNA的化学、PNA的杂交性质、作为分子生物学工具的套用、作为反义的和抗基因製剂的潜在套用、在诊断领域的套用以及在生物晶片和生物感测器中的套用。

1概述1

11基本概念1

12PNA的化学2

13PNA的物理化学性质3

14PNA作为分子生物学工具6

141增强的PCR扩增6

142PNA的预凝胶杂交7

143PNA辅助的稀有切割8

144人工限制性酶系统8

145测定端粒的大小8

146核酸的纯化9

15PNA作为诊断的工具9

16PNA在基因靶向药物研究中的套用10

161反义套用10

162抗基因性质10

163PNA的细胞内导入11

164抗微生物PNA12

165PNA在癌症基因治疗中的套用12

166抗病毒PNA12

17研製PNA的公司及其产品13

参考文献13

2PNA的化学22

21用BOC化学合成PNA寡聚物22

211PNA合成23

212合成方案28

213讨论35

参考文献37

22用FMOC化学合成PNA寡聚物39

221PNA合成41

222小结50

参考文献51

23PNA/DNA嵌合体51

231合成策略和单体PNA构成单元53

232Mmt/乙醯基保护的单体构成单元的合成循环54

233PNA和DNA之间连线剂的选择58

234实验方案59

235举例61

236讨论66

参考文献69

24用MMT化学合成PNADNA嵌合体71

241讨论73

242材料75

243方法76

244结论79

参考文献80

25PNA的标记81

251实验方案82

252举例83

253小结86

参考文献87

26手性PNA的合成89

261手性肽核酸单体的合成89

262以N氨乙基D脯氨酸为骨架的手性肽核酸的合成90

263用Fmoc工艺合成手性PNA(l或 dAla)单体及寡聚物91

参考文献99

3PNA的杂交性质和分析、检测100

31PNANA作用的热力学100

311样品製备的概况101

312吸收熔解曲线102

313等温滴定量热法106

314结论108

参考文献109

32PNA的性质110

321杂交亲和性110

322杂交条件111

323特异性识别能力111

33PNA双链DNA链顶替複合物及其鉴定技术111

331链顶替複合物的形成111

332PNA双链DNA链顶替複合物的鉴定技术113

333结语和前瞻127

参考文献127

34PNA与DNA修饰酶的相互作用129

341PNA对端粒酶活性的抑制129

342PNA检测解旋酶活性134

参考文献139

35基质辅助解吸飞行时间质谱检测PNA杂交物用于基因分析140

351实验方案142

352实验结果145

353讨论147

参考文献151

4PNA在分子生物学研究中的套用154

41PNA导向的基因组DNA特异切割154

411操作程式156

412实例157

413讨论159

参考文献162

42双链DNA的捕获165

421操作规程166

422实例168

423讨论169

参考文献172

43PNA亲和标记探针杂交、纯化核酸174

431操作规程176

432实例178

433套用和局限性179

参考文献180

44运用PNA进行质粒的标记182

441操作规程183

442实例结果187

443讨论190

参考文献191

45PNA封闭探针——增强探针分析的特异性191

451材料和方法192

452结果与讨论196

453结论203

参考文献203

46PCR锁止技术（PCR Clamping）204

461PCR锁止技术简介204

462操作规程206

463实例207

464展望211

参考文献211

47PNA预凝胶杂交212

参考文献214

5肽核酸在药物开发中的潜在套用215

51药物开发中的PNA技术216

511PNA的细胞内导入216

512PNA的反义作用218

513PNA的抗基因作用219

514PNA作为调节基因表达的工具223

参考文献224

52PNA作为抗菌剂227

参考文献232

53PNA在癌症基因治疗中的套用232

参考文献234

54PNA作为抗病毒药物235

参考文献236

55PNA药物的前景236

参考文献238

6PNA在诊断领域的套用239

61PNA技术239

611PNA探针239

612自身报告的PNA探针和QPNA PCR240

613PNA探针的设计243

参考文献245

62PNA探针的套用247

621PNA探针在组织化学的原位杂交中的套用247

622PNA萤光原位杂交（FISH）在细胞遗传学分析中的套用252

623PNA探针在微生物分析中的套用254

参考文献262

63PNA在流式细胞仪中套用265

参考文献267

64PNA探针套用前景展望267

参考文献268

7PNA在生物晶片和生物感测器中的套用270

71PNA阵列用于核酸检测271

711实验方案271

712结果277

713讨论279

参考文献280

72PNA生物感测器用于核酸检测281

721实验方案282

722举例284

723讨论和展望288

参考文献290

附录291