钩端螺旋体是一种细长柔软螺旋体，广泛存在于多种野生动物与家畜体内，可引起人类及哺乳动物的全身性感染，带菌动物是钩端螺旋体的主要传染源，以接触传播为主。在我国鼠和猫是主要传染源。当人感染后，採集发病2周的血液检查血清IgM抗体，对早期诊断钩端螺旋体病有重要价值。2～4周后出现IgG抗体，以后以IgG抗体为主。

钩端螺旋体乳胶凝集试验

钩端螺旋体病乳胶凝集试验

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钩端螺旋体病患者体内产生的抗体与胶乳抗原混合后产生清晰均匀的凝集颗粒。

（1）抗原製备：

①提取致敏物：将钩端螺旋体培养物（如黄疸出血热型）浓缩至菌数为100亿/ml。加苯酚至最终浓度为0.3%，使溶菌，取0.3%苯酚菌液1ml加无水乙醇9ml，置40℃冰柜24h，使抗原沉澱，然后2000r/min离心10min，取沉澱加硼酸缓冲液（pH8.2）至原量，即成致敏物。

②胶乳处理：取10%胶乳液3ml加1%胰蛋白酶液（硼酸缓冲液配製）1ml及硼酸缓冲液6ml，56℃水浴24h，取出用4000r/min离心45min，弃上清液，沉澱用硼酸缓冲液，稀释至5ml。

③致敏法：取致敏物10ml徐徐加入处理胶乳10ml，边加边摇，放入56℃水浴中24～48h（每天摇2～3次）。取出放室温3～5天测定后套用。

④抗原测定：取免疫血清、阳性患者血清、阴性血清及生理盐水各1滴，分别滴于玻片上，各加致敏胶乳抗原1滴，混匀，观察结果。如免疫血清及阳性血清均发生明显凝集，阴性血清及生理盐水仍为均匀乳状者，即可套用。

（2）钩端螺旋体免疫血清：由生物製品所供应，效价1∶6000为宜。

（1）将背面涂黑漆的玻板，正面清洁乾燥，用红油漆划成小圆圈（内径约2cm），或划成方格亦可。患者血清经56℃、30min灭活。

（2）试验时同时进行乳凝抑制试验及乳凝试验：于玻板上左右两侧划记号，各加患者血清两滴，左侧加免疫血清1滴混匀，室温放1～2min，于两侧各加胶乳抗原液1滴，混匀，1～3min观察结果。

0～1∶40。

阳性：滴度高于1∶40可作为钩端螺旋体病的诊断依据。

钩端螺旋体可直接镜检，简便、快速，有早期诊断意义，但阳性率低。也可製成乾片用镀银染色或直接萤光抗体染色或免疫酶染色法检查，尤以后者敏感性高，适用于早期诊断。

钩端螺旋体病、黄疸